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* 来源: * 作者: * 发表时间: 2021/12/06 22:13:11 * 浏览: 162
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在临床实验室实际工作中，实验人员在使用酶标仪进行测定操作时，有时难免会对酶标仪的一些性能指标产生迷惑，甚至对酶标仪的应用产生错误的理解如诸如使用酶标仪较用肉眼观察测定的阳性率明显增加这样的问题。 一、测定波长目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物通常为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为22-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0左右时，DAB在450nm波长处有最大吸收，当pH值降为L0时，最大吸收波长移至492nm同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数，如果HRP量少，H:O:和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。降低pH即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min.因此，450nm和492nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6~8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。。除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长范围就成为340-750nm或800nm。
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腹泻，排血样稀便尿黄，相继出现黏性、脓性结膜炎和鼻炎，鼻镜干燥龟裂、咳嗽。3剖检变化病狐脱水、贫血，气管充血、出血，肺充血、淤血，有出血斑，胃肠黏膜充血、出血，有溃疡灶，部分黏膜脱落，肠系膜淋巴结肿大，心脏扩张，心内、外膜充血、出血，肝脏肿大、贫血，脾脏肿大，有梗死灶，肾肿大，膀胱充血、出血。4实验室检查4.1犬瘟热检测取病死狐眼屎，用犬瘟热检测试剂盒检测，犬瘟热病呈阳性。4.2细菌培养无菌取肝脏，在普通琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基上37℃培养24小时，结果均无菌落生长。4.3镜检取静脉血涂片镜检，发现附红细胞体病感染非常严重。5诊断根据流行病学调查、临床症状、病理变化和实验室检查，确诊为狐犬瘟热病和附红细胞体病混合感染。6防治6.1紧急接种对没有发病的假定健康狐紧急接种由中国农业科学院特产研究所生产的犬瘟热疫苗和病毒性肠炎疫苗，每只狐各注射3mL。6.2病狐注射犬用六联高免血清和湖北伟达牧业科技有限公司生产的宠爱2号注射液（主要成分是恩诺沙星和利巴韦林），连用3天，7天后接种犬瘟热疫苗和病毒性肠炎疫苗。6.3加强饲养管理，全群内服盐酸土霉素、VK3粉和电解多维。6.4每年接种犬瘟热疫苗2次，第1次在配种前，即12月至下年1月进行。
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